Inngangur

Í nútíma lífeðlisfræðilegum og efnafræðilegum rannsóknarstofum,Einnota ræktunarrör eru mikið notuð í frumuræktun, efnahvörfum, varðveislu sýna og öðrum mikilvægum aðgerðum.Ekki er hægt að vanmeta mikilvægi þeirra í tilraunaferlinu. Þar sem þessi ræktunarrör eru í beinni snertingu við tilraunasýnin, mun efni þeirra, stærð, lokun og jafnvel hvort þau eru sótthreinsuð eða ekki hafa veruleg áhrif á tilraunaniðurstöðurnar. Óviðeigandi val getur leitt til krossmengunar, sýnataps eða skekkju í tilraunagögnum, sem hefur áhrif á nákvæmni og endurtekningarhæfni rannsóknarinnar.

Helstu gerðir einnota ræktunarröra

Það er til mikið úrval af einnota ræktunarrörum og vísindamenn þurfa að velja rétta gerð eftir tilgangi tilraunarinnar, rekstrarumhverfi og eiginleikum sýnanna. Þau eru flokkuð í eftirfarandi þrjá þætti: efni, rúmmál og sérstök virkni:

1. Flokkun eftir efni

Einnota ræktunarrör úr mismunandi efnum eru mismunandi að því er varðar hitaþol, efnastöðugleika og ljósfræðilega eiginleika:

• Pólýprópýlene: Góð viðnám gegn háum hita og efnatæringu, hentugur fyrir venjubundna frumuræktun, sameindalíffræðilegar tilraunir og önnur forrit.
• PólýstýrenMikil gegnsæi, auðvelt að fylgjast með vökva- og frumuástandi, almennt notað í sjónprófunum, en ekki með háum hitaþol, venjulega ekki hægt að nota til sjálfsofnunar.
• GlerræktunarrörÞótt þau séu endurnýtanleg og efnafræðilega stöðug eru þau dýr, þarfnast viðbótarþrifa og sótthreinsunar og hugsanlega er hætta á krossmengun.

2. Flokkun eftir afkastagetu

Rúmmál ræktunarröranna er á bilinu frá örsmáu til stórs magns, allt eftir því hversu mikið sýni þarf fyrir tilraunina:

• ÖrskiljunarrörAlgengt er að nota það til sýnatöku, miðflúgsútfellingar, DNA/RNA útdráttar og annarra aðgerða.
• Staðlaðar ræktunarrörAlgengasta geymslan í rannsóknarstofum, hentug fyrir frumuræktun, blöndun, varðveislu sýna og önnur verkefni.
• Ræktunarrör með stórum afkastagetuHentar fyrir stórfellda frumuræktun eða vinnslu á miklu magni af lausnum.

3. Flokkun eftir sérstökum aðgerðum

Rörurnar eru fáanlegar með ýmsum viðbótareiginleikum til að mæta sérstökum tilraunaþörfum:

• Sótthreinsuð slöngurSótthreinsað í verksmiðju með gammageislun eða sjálfsofnun, hentugt fyrir tilraunir með miklar sótthreinsandi kröfur.
• Með rörlykjulokiGerir kleift að skiptast á lofttegundum, hentar örverum eða frumulínum sem þurfa loftræstingu og kemur í veg fyrir mengun frá utanaðkomandi uppsprettum.
• Lágt hitastigsþolnar slöngurHægt er að nota það á öruggan hátt í -80℃ eða jafnvel fljótandi köfnunarefnisumhverfi, hentugt til langtímageymslu lífsýna við lágan hita.
• Kvörðuð/ókvörðuð rörKvörðunarrör eru þægileg til að meta og skammta fljótt vökvarúmmál til að auka skilvirkni tilrauna.

Lykilþættir við val á ræktunarrörum

Í ferli tilraunahönnunar og framkvæmdar er val á viðeigandi einnota ræktunarrörum afar mikilvægt til að tryggja skilvirkni tilrauna og nákvæmni niðurstaðna. Rannsakendur ættu að íhuga ítarlega nokkra lykilþætti:

1. Tegund tilraunar

Kröfur um ræktunarrör eru mjög mismunandi eftir tilraunum og ætti að velja þau í samræmi við efni aðgerðarinnar og tilraunaumhverfið:

• Fyrir frumuræktunKröfur um dauðhreinsun eru afar strangar og mælt er með notkun dauðhreinsaðra, forsótthreinsaðra röra með öndunarhæfum lokum til að tryggja loftaskipti.
• PCR / sameindalíffræðitilraunirSlöngur þurfa að vera lausar við DNA ensím, RNA ensím og pýrógenlausar slöngur, notið oft hreinar pólýprópýlen slöngur.
• Geymsla við lágt hitastigNota skal rör með góða lághitaþol til að forðast lýsi við lágt hitastig.

2. Einkenni sýnishorns

Eðlis- og efnafræðilegir eiginleikar sýnisins hafa bein áhrif á efnisval og virkni ræktunarröranna:

• Fljótandi eða föst sýniákvarðar nauðsynlegt rúmmál og lögun röropsins.
• Sýr eða basísk sýniMjög tærandi sýni þurfa efnaþolin efni til að koma í veg fyrir aflögun eða mengun rörsins.
• Hvort forðast eigi ljósLjósnæm sýni ættu að velja gult eða ógegnsætt ræktunarrör til að koma í veg fyrir ljósniðurbrot.

3. Kröfur um sótthreinsun

Þörfin fyrir sótthreinsun og tegund sótthreinsunar eru lykilatriði við val á slöngum:

• Forsótthreinsun vs. sjálfsótthreinsunVörur sem eru fyrirfram sótthreinsaðar í verksmiðju henta fyrir tilraunir með mikla afköst og spara tíma; ef rannsóknarstofan er með búnað til sótthreinsunar með sjálfsofnun er hægt að velja PP-slöngur sem hægt er að sjálfsofna.
• Eindrægni við sótthreinsunTil dæmis er PS-efni ekki hentugt til sjálfsofnunar og er aðeins til einnota.

4. Samhæfni

Rörin ættu að vera vel aðlöguð að rannsóknarstofubúnaðinum til að tryggja greiða notkun og áreiðanlegar niðurstöður:

• Miðflótta samhæfniRör sem notuð eru til skilvindu þurfa að vera sterkar að burðarvirki til að þola miðflóttaafl við mikinn snúningshraða.
• Sjálfvirkni samhæfniFyrir tilraunir sem krefjast notkunar pípettunarvélmenna, sjálfvirkra skömmtunarkerfa o.s.frv. verður að nota staðlaðar stærðir röra.

5. Kostnaður og sjálfbærni

Sanngjörn stjórnun á kostnaði og auðlindanotkun er einnig mikilvægur þáttur í að uppfylla tilraunaþarfir:

• Einnota vs. endurnýtanlegtEinnota rör eru auðveld í meðförum og koma í veg fyrir mengun, hentug fyrir tilraunir með mikla afköst; endurnýtanleg glerrör henta fyrir einfaldar tilraunir með takmarkað fjármagn.
• KaupskalaStórkaup geta lækkað einingarverðið, hentar fyrir langtíma, stór verkefni; smærri, sérsniðnar forskriftir eru sveigjanlegri en tiltölulega dýrar.

Tillögur um algengar umsóknarsviðsmyndir

Samkvæmt sérstökum þörfum mismunandi gerða tilrauna eru eftirfarandi einnota ræktunarrör ráðlögð fyrir nokkrar algengar notkunaraðstæður, með það að markmiði að bæta skilvirkni og áreiðanleika tilrauna:

1. Frumuræktun

• Ráðlagður gerðSótthreinsuð ræktunarrör úr pólýprópýleni með öndunarhæfum lokum úr rörlykjum
• ÁstæðaPólýprópýlen efni hefur góða efnafræðilega óvirkni og lífsamhæfni, hentar vel fyrir frumuræktunarvökva. Hylkihylkið getur framkvæmt skilvirka loftaskipti, komið í veg fyrir örverumengun og uppfyllt það lofttegundaumhverfi sem krafist er fyrir frumufjölgun.

2. PCR/qPCR sameindaútgáfa

• Ráðlagðar gerðir: núkleasa-fríar, pýrógen-fríar sérhæfðar PCR rör eða örskiljunarrör
• ÁstæðaPólýprópýlenrör úr mjög hreinum efnum geta, eftir stranga meðhöndlun, á áhrifaríkan hátt komið í veg fyrir niðurbrot eða mengun sýnanna og tryggt nákvæmar og áreiðanlegar niðurstöður mögnunar. Mælt er með þunnveggjahönnun til að bæta skilvirkni varmaflutnings.

3. Geymsla við lágt hitastig

• Ráðlagður gerðLágthitaþolin pólýprópýlen slöngur með frostvörn, sprunguvörn og skrúfuloki
• ÁstæðaÞessi rör má nota til að geyma sýni í langan tíma við -80°C eða jafnvel í fljótandi köfnunarefni, og sérstök uppbygging þeirra kemur í veg fyrir að rörin springi og leki úr þeim. Hentar til langtímageymslu á frumulínum, blóðsýnum, próteinum eða kjarnsýrum.

4. Skilvindu

• Ráðlagðar gerðirpólýprópýlenrör með háum þolþoli, með kringlóttum eða keilulaga botni, með skilvinduhnútum
• ÁstæðaPP rör hafa góða miðflóttaþol og þola mikla miðflóttaafl án þess að aflagast eða rifna. Keilulaga botninn hjálpar til við að safna frumum eða útfellingum í miðjunni og auka endurheimtarhraða.

Algeng mistök og leiðir til að forðast þau

Í reynd koma stundum fyrir að tilraunir mistakist vegna rangrar vals á ræktunarrörum. Nokkur algeng mistök og samsvarandi tillögur að lausnum eru taldar upp hér að neðan til viðmiðunar fyrir vísindamenn:

1. Misnotkun á efnum sem ekki þola háan hita við sjálfsofnun